mRNA合成
- mRNA Synthesis -

       瀚海新酶拥有线性化质粒模板制备所需的限制性内切酶、体外转录所需酶原料、修饰核苷、帽子类似物、纯化及质控所需的物料,可提供不同规格的高产量、高纯度、高性价比的mRNA定制合成。

       瀚海新酶提供从序列设计到mRNA合成的全流程服务,支持线性mRNA、saRNA、CircRNA等多种形式RNA的合成,更有专业的质控平台,能更好的为客户RNA相关产品的研发保驾护航。

技术流程
- 标准化mRNA -

       mRNA药物研究中,常需要现货mRNA原液作为细胞或动物实验对照,或进行纯化工艺摸索、填料筛选、mRNA表达水平优化、载体递送效率的评价等。 

       瀚海新酶提供COVID-19、编码EGPF 、Fluc或mCherry报告基因、DNA内切酶基因Cas9、促红细胞生成素基因EPO原等多种IVT mRNA原液现货,可选线性mRNA和saRNA形式,以期为mRNA研究提供更多的助力。

产品特点:
稳定性好
2-8℃可存放一个月,可反复冻融10次以上
性能优异
高完整度,加帽率97%以上
产品经细胞表达验证
蛋白表达量高于竞品
品类齐全,供应稳定
现货供应,货期短
· 点击此处前往官网了解更多产品信息
- 自复制RNA -

       自复制RNA(self-amplifying RNA,saRNA)是一种可以编码复制酶,在细胞内能以自身为模板自我复制的的mRNA。saRNA包含mRNA的基本元件(帽子、5'UTR、3'UTR和可变长度的聚腺苷酸尾),在5'末端有一个大的开放阅读框(ORF)编码四种非结构蛋白(nsP1–4)和一个亚基因组启动子,来实现RNA的自我复制。saRNA自我复制的特性可实现RNA药物更低的给药剂量,延长蛋白体内表达时间,并降低副作用。

       瀚海新酶可以提供saRNA的定制化合成服务,选用最优的表达元件、序列设计和碱基修饰,保证saRNA的体内和体外高效表达,更好的助力saRNA产品的研发。


案例1
案例2
产品名称
saRNA1
saRNA2
加帽方式
共转录
共转录
修饰核苷
UTP
UTP
mRNA长度
8000nt
9020nt
A260/280
2.1
2.1
外观
无杂质/沉淀
无杂质/沉淀
mRNA原液毛细管电泳核酸分析仪分析mRNA完整度
- CircRNA -

       circRNA(circular RNA,环状RNA)是一种新型的非编码RNA,由mRNA前体(pre-mRNA)的反向剪接产生 。与传统的线性RNA不同,circRNA 通过5'末端和3'末端以共价键形成的闭合环状结构,不受RNA核酸外切酶影响,表达更稳定且不易降解,且免疫原性更低。
       瀚海新酶可以提供CircRNA的定制化合成服务,支持不同片段长度的环状RNA合成,保证CircRNA的体内和体外高效表达,更好的助力体内Car-T、蛋白替代等RNA疗法,以及基因调控、药物递送等RNA相关产品研发。
 

提交需求
销售确认
序列设计(可选)
基因合成(可选)
质粒扩增(可选)
RNA原液合成
质检
服务流程
交付标准
- DELIVERY STANDARDS -
服务类别 
项目
用时(工作日) 
交付 
序列设计(不单独承接)
序列设计
5
序列文件
模板制备(不单独承接)
质粒合成
20
质粒测序文件,如客户要求,提供合成的原始质粒(1-2μg )
质粒扩增
5
质粒测序文件,如客户要求,生产有剩余质粒可提供给客户,无剩余质粒不作额外制备
mRNA原液合成
mRNA原液合成-非核苷酸修饰mRNA(科研级)
5
mRNA原液及COA
mRNA原液合成-核苷酸修饰mRNA(科研级)
5
mRNA原液合成-非核苷酸修饰mRNA(工业级)
5
mRNA原液合成-核苷酸修饰mRNA(工业级)
5
mRNA原液快速合成

(质粒快速合成至原液快速合成打包服务)

mRNA原液快速合成(科研级)
20
mRNA原液及COA
服务类别
项目
用时(工作日)
检测方法
可提供质检服务(不单独承接)
双链RNA
1
ELISA
总蛋白残留
1
Nano Orange
DNA模板残留
1
荧光定量PCR
内毒素
1
鲎试剂
RNase残留
1荧光探针法
DNase残留
1荧光探针法
宿主DNA残留
1荧光定量PCR
NTP和帽类似残留
1
HPLC
过往案例
- CASE -
可生产高纯度的不同长度的mRNA

案例1
案例2
案例3
案例4
产品名称
mRNA1
mRNA2
mRNA3
saRNA
加帽方式
共转录法加帽
共转录法加帽
共转录法加帽
共转录法加帽
修饰核苷
N1-Me-pUTP
N1-Me-pUTP
N1-Me-pUTP
N1-Me-pUTP
mRNA长度
500nt
1000nt
2000nt
4000nt
A260/280
1.85
1.84
1.881.92
外观
无杂质/沉淀
无杂质/沉淀
无杂质/沉淀无杂质/沉淀
毛细管电泳核酸分析
mRNA完整度
可提供mRNA原液的多个检项
检测项
案例1 
案例2 
案例3 
案例4 
mRNA完整度
90.6%
91.9%
93.2%
91.4%
内毒素残留
<10EU/mg
<10EU/mg
<10EU/mg
<10EU/mg
RNase残留
<1.56x10^-9 U/μL
<1.56x10^-9 U/μL
<1.56x10^-9 U/μL
<1.56x10^-9 U/μL
蛋白残留
<0.5μg/mg
0.521μg/mg
0.53μg/mg
0.5μg/mg
质粒模板残留
3.07x10^-4 μg/mg
5.18x10^-6 μg/mg
1.05x10^-4 μg/mg
7.21x10^-5 μg/mg
dSRNA残留
0.0789%
0.1749%
0.0389%
0.3266%
加帽率
98.71%
100%
98.77%
100%
Poly(A)分布
合格
合格
合格
合格
序列正确度
合格
合格
合格
合格
CircRNA 定制化合成
Buffer 梯度
Buffer梯度1
44.0%
Buffer梯度2
48.7%
Buffer梯度3 44.3%
反应温度
41℃ 39.5%
43℃ 50.3%
45℃ 59.0%
47℃ 64.2%
53℃49.9%
RNaseR消化处理
分析时间(分钟)
分析时间(分钟)
分析时间(分钟)
经过Buffer,T7突变体,反应体系,反应温度优化,成环比例显著提升。
RNaseR消化处理,circRNA环状比例达90%以上。
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