瀚海新酶拥有线性化质粒模板制备所需的限制性内切酶、体外转录所需酶原料、修饰核苷、帽子类似物、纯化及质控所需的物料,可提供不同规格的高产量、高纯度、高性价比的mRNA定制合成。
瀚海新酶提供从序列设计到mRNA合成的全流程服务,支持线性mRNA、saRNA、CircRNA等多种形式RNA的合成,更有专业的质控平台,能更好的为客户RNA相关产品的研发保驾护航。
mRNA药物研究中,常需要现货mRNA原液作为细胞或动物实验对照,或进行纯化工艺摸索、填料筛选、mRNA表达水平优化、载体递送效率的评价等。
瀚海新酶提供COVID-19、编码EGPF 、Fluc或mCherry报告基因、DNA内切酶基因Cas9、促红细胞生成素基因EPO原等多种IVT mRNA原液现货,可选线性mRNA和saRNA形式,以期为mRNA研究提供更多的助力。
自复制RNA(self-amplifying RNA,saRNA)是一种可以编码复制酶,在细胞内能以自身为模板自我复制的的mRNA。saRNA包含mRNA的基本元件(帽子、5'UTR、3'UTR和可变长度的聚腺苷酸尾),在5'末端有一个大的开放阅读框(ORF)编码四种非结构蛋白(nsP1–4)和一个亚基因组启动子,来实现RNA的自我复制。saRNA自我复制的特性可实现RNA药物更低的给药剂量,延长蛋白体内表达时间,并降低副作用。
瀚海新酶可以提供saRNA的定制化合成服务,选用最优的表达元件、序列设计和碱基修饰,保证saRNA的体内和体外高效表达,更好的助力saRNA产品的研发。
案例1 | 案例2 | |
产品名称 | saRNA1 | saRNA2 |
加帽方式 | 共转录 | 共转录 |
修饰核苷 | UTP | UTP |
mRNA长度 | 8000nt | 9020nt |
A260/280 | 2.1 | 2.1 |
外观 | 无杂质/沉淀 | 无杂质/沉淀 |
mRNA原液毛细管电泳核酸分析仪分析mRNA完整度 |
circRNA(circular RNA,环状RNA)是一种新型的非编码RNA,由mRNA前体(pre-mRNA)的反向剪接产生 。与传统的线性RNA不同,circRNA 通过5'末端和3'末端以共价键形成的闭合环状结构,不受RNA核酸外切酶影响,表达更稳定且不易降解,且免疫原性更低。
瀚海新酶可以提供CircRNA的定制化合成服务,支持不同片段长度的环状RNA合成,保证CircRNA的体内和体外高效表达,更好的助力体内Car-T、蛋白替代等RNA疗法,以及基因调控、药物递送等RNA相关产品研发。
服务类别 | 项目 | 用时(工作日) | 交付 |
序列设计(不单独承接) | 序列设计 | 5 | 序列文件 |
模板制备(不单独承接) | 质粒合成 | 20 | 质粒测序文件,如客户要求,提供合成的原始质粒(1-2μg ) |
质粒扩增 | 5 | 质粒测序文件,如客户要求,生产有剩余质粒可提供给客户,无剩余质粒不作额外制备 | |
mRNA原液合成 | mRNA原液合成-非核苷酸修饰mRNA(科研级) | 5 | mRNA原液及COA |
mRNA原液合成-核苷酸修饰mRNA(科研级) | 5 | ||
mRNA原液合成-非核苷酸修饰mRNA(工业级) | 5 | ||
mRNA原液合成-核苷酸修饰mRNA(工业级) | 5 | ||
mRNA原液快速合成 (质粒快速合成至原液快速合成打包服务) | mRNA原液快速合成(科研级) | 20 | mRNA原液及COA |
服务类别 | 项目 | 用时(工作日) | 检测方法 |
可提供质检服务(不单独承接) | 双链RNA | 1 | ELISA |
总蛋白残留 | 1 | Nano Orange | |
DNA模板残留 | 1 | 荧光定量PCR | |
内毒素 | 1 | 鲎试剂 | |
RNase残留 | 1 | 荧光探针法 | |
DNase残留 | 1 | 荧光探针法 | |
宿主DNA残留 | 1 | 荧光定量PCR | |
NTP和帽类似残留 | 1 | HPLC |
案例1 | 案例2 | 案例3 | 案例4 | |
产品名称 | mRNA1 | mRNA2 | mRNA3 | saRNA |
加帽方式 | 共转录法加帽 | 共转录法加帽 | 共转录法加帽 | 共转录法加帽 |
修饰核苷 | N1-Me-pUTP | N1-Me-pUTP | N1-Me-pUTP | N1-Me-pUTP |
mRNA长度 | 500nt | 1000nt | 2000nt | 4000nt |
A260/280 | 1.85 | 1.84 | 1.88 | 1.92 |
外观 | 无杂质/沉淀 | 无杂质/沉淀 | 无杂质/沉淀 | 无杂质/沉淀 |
毛细管电泳核酸分析 mRNA完整度 |
检测项 | 案例1 | 案例2 | 案例3 | 案例4 |
mRNA完整度 | 90.6% | 91.9% | 93.2% | 91.4% |
内毒素残留 | <10EU/mg | <10EU/mg | <10EU/mg | <10EU/mg |
RNase残留 | <1.56x10^-9 U/μL | <1.56x10^-9 U/μL | <1.56x10^-9 U/μL | <1.56x10^-9 U/μL |
蛋白残留 | <0.5μg/mg | 0.521μg/mg | 0.53μg/mg | 0.5μg/mg |
质粒模板残留 | 3.07x10^-4 μg/mg | 5.18x10^-6 μg/mg | 1.05x10^-4 μg/mg | 7.21x10^-5 μg/mg |
dSRNA残留 | 0.0789% | 0.1749% | 0.0389% | 0.3266% |
加帽率 | 98.71% | 100% | 98.77% | 100% |
Poly(A)分布 | 合格 | 合格 | 合格 | 合格 |
序列正确度 | 合格 | 合格 | 合格 | 合格 |